尼帕病毒抗体检测试剂盒（酶联免疫法）

尼帕病毒IgG/IgM抗体检测试剂盒（酶联免疫法）

介绍

本体外ELISA试剂盒采用间接法。将病原体抗原包被于标准96孔板上，该抗原与样本和阳性对照中存在的相应抗体结合，阳性对照用作校准曲线以进行结果判读。加入生物素标记的二抗（抗人IgA/G/M抗体）后，生物素标记的二抗与结合于蛋白包被板上的人源抗体形成复合物。加入TMB底物后，显色反应生成蓝色。显色深度与人源抗病原体抗原抗体的浓度相关。加入终止液后，颜色由蓝色变为黄色，并在450 nm波长处测定吸光度值。

阳性对照由抗病原体抗原抗体组成。将生物素标记的抗阳性对照抗体加入阳性对照孔中，并进行与样本相同的处理。所得颜色强度（在 450 nm 处测量）用作校准曲线，以便在不同检测中进行结果判读。

套件组件

成分 尺寸/描述

病原抗原包被的96孔微孔板 96孔板（12条×8孔），包被有病原体抗原

洗涤缓冲液浓缩液（20X） 25毫升20倍浓缩溶液

阳性对照 1瓶含有抗病原体抗原抗体的阳性对照样品

生物素标记的抗人Ig(A/G/M) 1瓶溶液

生物素标记的抗阳性对照 1瓶溶液

HRP-链霉亲和素浓缩物 1瓶溶液

TMB一步法底物试剂 12 毫升 3,3,5,5'-四甲基联苯胺（TMB 缓冲溶液）

停止解决方案 8毫升0.2M硫酸

测定稀释液 B 15毫升5倍浓缩缓冲液

5倍样品稀释剂 25毫升5倍稀释缓冲液，0.5% Proclin 300作为防腐剂

所需其他材料

能够测量 450 nm 波长吸光度的微孔板读数仪

摇晃器

能够精确移取 2 微升至 1 毫升体积的移液器

用于试剂配制的 1-25 ml 可调移液器

量筒：100毫升和1升

蒸馏水或去离子水

吸水纸

检测程序概要

按照说明准备所有试剂、样品和标准品。

向每个孔中加入100 µl阳性对照或样品。室温孵育1小时。

将100 µl制备好的生物素标记抗阳性对照抗体和生物素标记抗人Ig(A/G/M)抗体分别加入相应的孔中。室温孵育1小时。

向每个孔中加入100 µl配制好的HRP-链霉亲和素溶液。室温孵育30分钟。

向每个孔中加入100 µl TMB一步法底物试剂。室温孵育30分钟。

向每个孔中加入50 µl终止液。立即在450 nm处读取吸光度值。