最新-基孔肯雅热病毒IgG\IgM抗体检测试剂盒（酶联免疫法）

基孔肯雅热病毒IgGIgM抗体检测试剂盒（酶联免疫法）

说  明  书

【产品名称】

通用名：基孔肯雅热病毒IgGIGM抗体检测试剂盒（酶联免疫法) 

【包装规格】96  人份/盒

【预期用途】

该产品用于定性检测人血清或血浆中存在基孔肯雅热病毒IgG抗体。

【检验原理】

试剂盒微孔板包被基孔肯雅热病毒抗原，在与稀释的患者血清的第一次孵育期间，任何与抗原发生反应的抗 体都会与包被的孔结合。清洗除去样品的其余部分后，添加酶缀合物。如果抗体已与孔结合，则酶结合物将与这些 抗体结合。另一系列洗涤后，添加色原（四甲基联苯胺或 TMB）。如果存在酶结合物，过氧化物酶将催化消耗过氧 化物的反应，并将色原从透明变为蓝色。添加终止溶液终止反应并将蓝色变为亮黄色。然后可以目视或使用 ELISA 酶标仪读取 OD 值。生物素系统（biotin-avidin system）的稳固级联放大作用，使试剂的特异性、灵敏度、稳定性极 大地提高。

【主要组成成份】

【贮存条件及有效期】

2-8℃密封保存，避免冻结。有效期 12 个月。 【适用仪器】

各类国产和进口酶标仪均可使用，检测波长 450nm。 【样本要求】

1、尽量用新鲜标本，如需保存，可于 2-8℃冷藏 48 小时或-20℃冻存 4 周（样本应避光）。避免反复冻融（3 次以 上）。

2、避免用溶血、混浊或脂血标本。

3、样本若需运输，应保持 2-8℃或冻存状态。

4、标本中避免加入抗凝剂或保护剂或防腐剂， 以免影响试验结果。

【检验方法】

检测步骤

1.将恒温箱/水浴设定在37±1°℃。

2.使用前将所有试剂恢复至室温(约1小时)，但不要将微孔板从袋中取出。

3.将所有组分轻轻摇匀。

4.从包装中取出微孔板，根据需要确定使用孔数，预留4个孔用于对照:两个用于临界值对照，阳性和阴性对照各一个。未使用的孔应放回袋中并密封保存。

5.先向各孔加入100 m血清稀释液，然后分别向相应孔中加入5 m阳性对照、5 ml临界值对照(做复孔)以及5 阴性对照。

6.若手工操作，需将板置于板振荡器上震荡(1分钟)，使试剂充分混匀。若无法保证有效震荡，则应在另一试管或板中先进行样本预稀释，使用双倍体积的试剂和样本，用移波器充分混匀后，向各孔中加入105u稀释后的样本，

7.用封板膜覆盖，37+1°C孵育45分钟。8.取下封板膜，吸去各孔液体，每孔用300ul洗涤液洗板五次，拍干残留液体。9.立即向每孔加入100 m酶标抗体溶液。10.用封板膜覆盖，37+1°C孵育30分钟，11.取下封板膜，吸去各孔液体，每孔用300ul洗涤液洗板五次，拍干残留液体。

99寸A

立即向每孔加入100 m底物溶液,避光，室温孵育20分钟。

立即向所有孔中加入50 ul终止液。

终止反应后1小时内使用分光光度计在450/620 nm波长读数。

备注：将浓缩洗涤液用蒸馏水 1 ：20 稀释待用（如：1ml 浓缩洗涤液---19ml 蒸馏水）

【检验结果的解释】

1 、目测：在白色背景下观察各孔显色情况，黄色者为阳性，无色者为阴性。

2、酶标仪测定：每孔加终止液 50ul，混匀后在 450nm 波长下以空白孔调零后测定各孔 O.D 值。 A、阴性对照 OD≤0.5；

B、阳性对照 OD≥0.9；

C、0.55≤临界值 OD≤1.5

3、质控品OD值要符合说明书区间则实验结果成立，否则实验可能产生偏差，需重新试验。 

【阳性判断值或者参考区间】 

【检验方法的局限性】

1、本试剂盒检测结果只作为辅助诊断，疾病的确诊需要结合临床症状/体征和其他检查方法方可做出判断。 

【产品性能指标】

1、灵敏度：检测 88 份阳性标本，检测结果为阳性有 75份，灵敏度为 86%。

2 、特异性：检测88 份阴性标本，检测结果为阴性有 86 份，灵敏度为 98%。

3、批内差：同一批次的试剂，对一份阳性血清进行测定，各板孔对测定结果的变异系数小于 15%。 

【注意事项】

1 、试剂盒仅供体外诊断用。

2、微孔板须密封防潮，从冷藏环境中取出时，应置室温平衡至潮气尽干后方可开启使用，余者封存置 2-8℃短期

内用完。

3、滴加试剂前应将滴瓶翻转数次混匀，滴加时保持瓶身垂直。

4、洗涤时每孔均须加满，防止孔内有游离酶不能洗净。

5、试剂置 2-8℃存放，不能冻结。

6、本试剂盒中阴阳性对照虽不含人源性血清成分，但应严格按常规作为污染物处理。 【参考文献】

【说明书批准及修改日期】 2024年11月01日